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      操作條件對色譜分離的影響

       更新時(shí)間:2011-12-23 點(diǎn)擊量:3508

      操作條件對于色譜分離有很大影響。
           柱長(cháng),柱內徑:一般講,柱管增長(cháng),可改善分離能力,短則組分餾出的快些;柱內徑小分離效果好,柱內徑大處理量大,但柱內徑過(guò)大,將導致?lián)w不能均勻地分布在色譜柱中。分析用柱管一般內徑為3-6毫米,柱長(cháng)為1-4米。
           柱溫:是一個(gè)重要的操作變數,直接影響分離效能和分析速度。選擇柱溫的根據是混合物的沸點(diǎn)范圍,固定液的配比和鑒定器的靈敏度。提高柱溫可縮短分析時(shí)間;降低柱溫可使色譜柱選擇性增大,有利于組分的分離和色譜柱穩定性提高,柱壽命延長(cháng)。一般采用等于或高于數十度于樣品的平均沸點(diǎn)的柱溫為較合適,對易揮發(fā)樣用低柱溫,不易揮發(fā)的樣品采用高柱溫。
           載氣流速:載氣流速是決定色譜分離的重要原因之一。一般講流速高色譜峰狹,反之則寬些,但流速過(guò)高或過(guò)低對分離都有不利的影響。流速要求要平穩,常用的流速范圍每分鐘在10-100亳升之間。
           固定相:固定相是由固體吸附劑或涂有固定液的擔體構成。
      (1)固體吸附劑或擔體粗細:一般采用40-60目、60-80目、80-100目。當用同等長(cháng)度的柱子,顆粒細的分離效率就要比粗的好些。
      (2)固定液含量:固定液含量對分離效率的影響很大,它與擔體的重量比一般用15%-25%。比例過(guò)大有損于分離,比例過(guò)小會(huì )使色譜峰拖尾。
          進(jìn)樣:一般講進(jìn)樣快,進(jìn)樣量小,進(jìn)樣溫度高其分離效果好。對進(jìn)液體樣,速度要快,汽化溫度要高于樣品中高沸點(diǎn)組分的沸點(diǎn)值,一次汽化,保證色譜峰形不致展寬、使柱效高。當進(jìn)樣量在一定限度時(shí),色譜峰的半峰寬是不變的。若進(jìn)樣量過(guò)多就會(huì )造成色譜柱超載。一般講柱長(cháng)增加四倍,樣品的許可量增加一倍。對于常規分析,液體進(jìn)樣量為1-20微升;氣體進(jìn)樣量為0.1-5毫升。