一、分離原理：
1.氣相：氣相色譜是一種物理的分離方法。利用被測物質(zhì)各組分在不同兩相間分配系數（溶解度）的微小差異，當兩相作相對運動(dòng)時(shí)，這些物質(zhì)在兩相間進(jìn)行反復多次的分配，使原來(lái)只有微小的性質(zhì)差異產(chǎn)生很大的效果，而使不同組分得到分離。
2.液相：液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎上，引用了氣相色譜的理論，在技術(shù)上，流動(dòng)相改為高壓輸送（zui高輸送壓力可達4.9′107Pa）;色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜（每米塔板數可達幾萬(wàn)或幾十萬(wàn)）；同時(shí)柱后連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進(jìn)行連續檢測。
二、應用范圍：
1.氣相：氣相色譜法具有分離能力好，靈敏度高，分析速度快，操作方便等優(yōu)點(diǎn)，但是受技術(shù)條件的限制，沸點(diǎn)太高的物質(zhì)或熱穩定性差的物質(zhì)都難于應用氣相色譜法進(jìn)行分析。一般對500℃以下不易揮發(fā)或受熱易分解的物質(zhì)部分可采用衍生化法或裂解法。
2.液相：液相色譜法，只要求試樣能制成溶液，而不需要氣化，因此不受試樣揮發(fā)性的限制。對于高沸點(diǎn)、熱穩定性差、相對分子量大（大于 400 以上）的有機物（ 些物質(zhì)幾乎占有機物總數的 75% ～ 80% ）原則上都可應用液相色譜法來(lái)進(jìn)行分離、分析。 據統計，
三、儀器構造：
1.氣相：由載氣源、進(jìn)樣部分、色譜柱、柱溫箱、檢測器和數據處理系統組成。進(jìn)樣部分、色譜柱和檢測器的溫度均在控制狀態(tài)。
1.1 柱箱：色譜柱是氣相色譜儀的心臟， 樣品中的各個(gè)組份在色譜柱中經(jīng)過(guò)反復多次分配后得到分離，從而達到分析的目的， 柱箱的作用就是安裝色譜柱。
由于色譜柱的兩端分別連接進(jìn)樣器和檢測器， 因此進(jìn)樣器和檢測器的下端（ 接頭） 均插入柱箱。
柱箱能夠安裝各種填充柱和毛細管柱， 并且操作方便。
色譜柱（ 樣品） 需要在一定的溫度條件下工作， 因此采用微機對柱箱進(jìn)行溫度控制。并且由于設計合理， 柱箱內的梯度很小。
對于一些成份復雜、沸程較寬的樣品， 柱箱還可進(jìn)行三階程序升溫控制。且程序設定后自動(dòng)運行無(wú)需人工干預，降溫時(shí)還能自動(dòng)后開(kāi)門(mén)排熱。
1.2 進(jìn)樣器：
進(jìn)樣器的作用是將樣品送入色譜柱。如果是液體樣品， 進(jìn)樣器還必須將其汽化，因此采用微機對進(jìn)樣器進(jìn)行溫度控制。
根據不同種類(lèi)的色譜柱及不同的進(jìn)樣方式， 共有五種進(jìn)樣器可供
選擇：
1.填充柱進(jìn)樣器
2.毛細管不分流進(jìn)樣器附件
3.毛細管分流進(jìn)樣器附件
4.毛細管分流/不分流進(jìn)樣器
5.六通閥氣體進(jìn)樣器
1.3檢測器:
檢測器的作用是將樣品的化學(xué)信號轉化為物理信號（ 電信號） 。
檢測器也需要在一定的溫度條件下才能正常工作， 因此采用微機對檢測器進(jìn)行溫度控制。
根據各種樣品的化學(xué)物理特性， 共有五種檢測器可供選擇：
1.氫火焰離子化檢測器（FID）
2.熱導檢測器（TCD）
3.電子捕獲檢測器（ECD）
4.氮磷檢測器（NPD）
5.火焰光度檢測器（FPD）
1.4 數據處理系統
該系統可對測試數據進(jìn)行采集、貯存、顯示、打印和處理等操作，使樣品的分離、制備或鑒定工作能正確開(kāi)展。
2.液相：液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統組成。
2.1 進(jìn)樣系統
一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作，進(jìn)樣量是恒定的。這對提高分析樣品的重復性是有益的。
2.2 輸液系統
該系統包括高壓泵、流動(dòng)相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強為l．47～4．4X107Pa，流速可調且穩定，當高壓流動(dòng)相通過(guò)層析柱時(shí)，可降低樣品在柱中的擴散效應，可加快其在柱中的移動(dòng)速度，這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動(dòng)相貯存錯和梯度儀，可使流動(dòng)相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變，包括改變洗脫液的極性、離子強度、PH值，或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(zhì)（即使僅有一個(gè)基團的差別或是同分異構體）都能獲得有效分離。
3.3 分離系統
該系統包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長(cháng)度為10～50cm（需要兩根連用時(shí)，可在二者之間加一連接管），內徑為2～5mm，由"不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成，住內裝有直徑為5～10μm粒度的固定相（由基質(zhì)和固定液構成）．固定相中的基質(zhì)是由機械強度高的樹(shù)脂或硅膠構成，它們都有惰性（如硅膠表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔徑可達1000?）和比表面積大的特點(diǎn)，加之其表面經(jīng)過(guò)機械涂漬（與氣相色譜中固定相的制備一樣），或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因（如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長(cháng)度碳鏈的烷基等）或配體的有機化合物。
因此，這類(lèi)固定相對結構不同的物質(zhì)有良好的選擇性。例如，在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素（PSA）后，就可以把成纖維細胞中的一種糖蛋白分離出來(lái)。另外，固定相基質(zhì)粒小，柱床極易達到均勻、致密狀態(tài)，極易降低渦流擴散效應?；|(zhì)粒度小，微孔淺，樣品在微孔區內傳質(zhì)短。這些對縮小譜帶寬度、提高分辨率是有益的。根據柱效理論分析，基質(zhì)粒度小，塔板理論數N就越大。這也進(jìn)一步證明基質(zhì)粒度小，會(huì )提高分辨率的道理。
再者，液相色譜的恒溫器可使溫度從室溫調到60C，通過(guò)改善傳質(zhì)速度，縮短分析時(shí)間，就可增加層析柱的效率。
2.4 檢測系統
液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種。
（1）紫外檢測器
該檢測器適用于對紫外光（或可見(jiàn)光）有吸收性能樣品的檢測。其特點(diǎn)：使用面廣（如蛋白質(zhì)、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用）；靈敏度高（檢測下限為10-10g／ml）；線(xiàn)性范圍寬；對溫度和流速變化不敏感；可檢測梯度溶液洗脫的樣品。
（2）示差折光檢測器
凡具有與流動(dòng)相折光率不同的樣品組分，均可使用示差折光檢測器檢測。，糖類(lèi)化合物的檢測 使用此檢測系統。這一系統通用性強、操作簡(jiǎn)單，但靈敏度低（檢測下限為10-7g／ml），流動(dòng)相的變化會(huì )引起折光率的變化，因此，它既不適用于痕量分析，也不適用于梯度洗脫樣品的檢測。
（3）熒光檢測器
凡具有熒光的物質(zhì)，在一定條件下，其發(fā)射光的熒光強度與物質(zhì)的濃度成正比。因此，這一檢測器只適用于具有熒光的有機化合物（如多環(huán)芳烴、氨基酸、胺類(lèi)、維生素和某些蛋白質(zhì)等）的測定，其靈敏度很高（檢測下限為10-12～10-14g／ml），痕量分析和梯度洗脫作品的檢測均可采用。
2.5 數據處理系統
該系統可對測試數據進(jìn)行采集、貯存、顯示、打印和處理等操作，使樣品的分離、制備或鑒定工作能正確開(kāi)展。
