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      反相色譜法用的乙腈與甲醇的區別

       更新時(shí)間:2010-07-06 點(diǎn)擊量:4836

      1、首先,乙腈價(jià)格高

        乙腈,特別是HPLC級的價(jià)格很高,但是,文獻或LC廠(chǎng)家所示的條件,多用乙腈,這是為什么呢?現就此談?wù)劇?/p>

        2、吸光度

        乙腈HPLC級的小。乙腈和甲醇的市銷(xiāo)HPLC級和優(yōu)級的吸收光譜中,乙腈HPLC吸收zui?。ㄌ貏e是在短波長(cháng)上?。?。所謂HPLC級是除去具有吸收UV的雜質(zhì),在規定的波長(cháng)上吸光度限制在規格值以?xún)?。在UV檢測時(shí),產(chǎn)生的噪聲小,因此在進(jìn)行UV短波長(cháng)上的高靈敏度分析時(shí)乙腈HPLC級zui適宜。另外,在UV檢測中的梯度基線(xiàn)上也是乙腈HPLC級產(chǎn)生鬼峰少,雖然,其他與水相溶性高的有機溶劑有各種各樣,但很難能找到比乙腈HPLC級吸收更小的。另外,甲醇的HPLC級和優(yōu)級,雖然所得的光譜相差不大,但是優(yōu)級不能保證吸光度,有可能產(chǎn)生偏差,價(jià)格也相差不大,所以盡量使用HPLC級。

        3、壓力

        乙腈低,柱內承受的壓力,根據有機溶劑的種類(lèi)或混合比率的不同而異,水/乙腈,水/甲醇混合液的比率與輸液壓力的關(guān)系中,甲醇與水混合,壓力增高,而乙腈同樣與水混合且并不如此。所以,乙腈一方,在同樣的流速下不在柱內加上多余的壓力。從上述兩項,可以確認使用乙腈的意義,那么,甲醇除了價(jià)格以外,還有沒(méi)有其化優(yōu)點(diǎn)呢?

        4、洗脫能力

        一般而言,乙腈較強。乙腈和甲醇分別用同樣的比率與水混合時(shí),一般情況下,乙腈的洗脫能力強。特別是混合比率低時(shí),從咖啡因和苯酚的洗脫來(lái)看,獲得同樣的保留時(shí)間,乙腈的比率,只需甲醇的比率的一半以下即可。另一方面,有機溶劑100%或與此極接近時(shí),從胡蘿卜素和膽甾醇來(lái)看,常常都是甲醇的洗脫能力強?;旌媳仍?0比1等較為特殊時(shí),調制的誤差大,影響保留時(shí)間,或平衡化的時(shí)間長(cháng),乙腈遇到這種情況時(shí),用甲醇的10比1混合代替乙腈,這樣操作方便些。溶劑受溫度影響時(shí),不采用容器定量,而采用重量的方法(考慮比重),可使混合比的誤差減小。

        5、分離(洗脫)的選擇性

        兩者的差異,乙腈和甲醇在分離的選擇性上不同。由于有機溶劑分子的化學(xué)性質(zhì)(甲醇和乙醇是質(zhì)子性,乙腈和四氫呋喃是非質(zhì)子性)不同所致。因此,在用乙腈類(lèi)不能獲得分離的選擇性,就試用甲醇類(lèi)看看。

        6、峰形

        用時(shí)出現差異。像水楊酸化合物(在鄰位上具有羧基或甲氧基的苯酚化合物)等,用乙腈類(lèi)時(shí)拖尾大,用甲醇類(lèi)可抑制??墒?,一般情況下,聚合物類(lèi)反相柱,與硅膠柱相比,更具有峰形寬的傾向,特別是用聚苯乙烯分析柱芳香族化合物等時(shí)常見(jiàn)。這在流動(dòng)相是甲醇時(shí)非常顯著(zhù),而用乙腈時(shí)不明顯。為此,用聚合物類(lèi)反相用柱時(shí)建議采用后者(乙腈類(lèi)),這是因為乙腈使凝膠膨潤。

        7、流動(dòng)相的脫氣,乙腈類(lèi)要注意

        混合溶劑的置制,不說(shuō)在LC裝置內,只談預先在流動(dòng)相瓶?jì)冗M(jìn)行時(shí),(等濃度系統)。甲醇與水混合時(shí)發(fā)熱,多余的溶解空氣較易變?yōu)槊摮鰵馀荩摎馊菀祝?。而乙腈由于吸熱冷卻,隨著(zhù)慢慢回到室溫,產(chǎn)生氣泡,所以要考慮脫氣(加溫攪拌,過(guò)濾膜,He脫氣等)。

        8、結論

        以上反相色譜法流動(dòng)相常用的乙腈和甲醇進(jìn)行了比較。粗略地講是,使用乙腈HPLC級,在選擇性,峰形差時(shí)試用甲醇HPLC,但根據各種不用性質(zhì)設計分析條件也是必要的。